梅花鹿茸不同生长期顶端茸皮组织NGF基因DNA甲基化差异研究DNA Methylation Difference of NGF Gene in Apical Tissue of Pilose Antlerat Different Stages
孙佳阳;张芙蕊;郭梦雅;韩若冰;夏彦玲;李和平;
摘要(Abstract):
以梅花鹿茸生长过程的3个重要时期——小鞍子(前期)、二杠(中期)、三杈(后期)的顶端茸皮组织为试验材料,采用BSP法对前、中、后期鹿茸茸皮组织NGF基因启动子区进行DNA甲基化检测与甲基化率的比较分析。结果表明:NGF基因在前、中、后期的茸皮组织均发生不同程度的甲基化,甲基化率分别为(23.99±0.66)%、(22.22±1.78)%和(15.10±1.55)%,但它们之间的甲基化率无显著差异(P>0.05)。NGF基因启动子区的甲基化区域共有30个CG位点,在35,39,42,52,66,95 bp处均发生甲基化,但差异不显著(P>0.05);在115,125,135 bp处前期与后期甲基化率差异显著(P<0.05),前期与中期、中期与后期均差异不显著(P>0.05);223,225,227 bp处的甲基化率前期与中期均显著高于后期(P<0.05),前期与中期差异不显著(P>0.05);在246 bp处甲基化率前期与中期、中期与后期、前期与后期均差异极显著(P<0.01);在347 bp处甲基化率前期显著高于中期与后期(P<0.05),中期与后期甲基化率差异不显著(P>0.05)。
关键词(KeyWords): 梅花鹿;鹿茸;DNA甲基化;基因启动子区;BSP技术
基金项目(Foundation): 国家重点研发计划项目(2018YFC1706601)
作者(Authors): 孙佳阳;张芙蕊;郭梦雅;韩若冰;夏彦玲;李和平;
DOI: 10.13326/j.jea.2021.1601
参考文献(References):
- [1] 鲍加荣,杨福合,荣敏,等.鹿茸发育研究进展[J].特产研究,2008,30(2):64-67,72.
- [2] Kierdorf U,Kierdorf H,Szuwart T.Deer antler regeneration:Cells,concepts,and controversies[J].Journal of Morphology,2007,268(8):726-738.
- [3] 郝丽,李和平,严厉.东北梅花鹿鹿茸尖端组织全长cDNA文库的构建[C]//首届中国鹿业发展大会暨中国畜牧业协会鹿业分会成立大会论文集.北京:中国畜牧业协会,2010:273-276.
- [4] Delsite R,Djakiew D.Characterization of nerve growth factor precursor protein expression by human prostate stromal cells:a role in selective neurotrophin stimulation of prostate epithelial cell growth[J].The Prostate,1999,41(1):39-48.
- [5] Zhuang Y F,Li J.Serum EGF and NGF levels of patients with brain injury and limb fracture[J].Asian Pacific Journal of Tropical Medicine,2013,6(5):383-386.
- [6] 何忠梅,吕伟,孙玉滨,等.鹿茸抗骨质疏松症研究进展[J].经济动物学报,2015,19(3):172-175.
- [7] 胡太超,刘玉敏,陶荣珊,等.鹿茸多肽的抗疲劳作用机制研究[J].吉林农业大学学报,2015,37(4):469-476.
- [8] 林伟欣,张争明,杨静.梅花鹿茸水溶性蛋白质的浸提及含量测定[J].经济动物学报,2017,21(4):205-210.
- [9] 李全辉,徐祝军.神经生长因子对骨折愈合的影响[J].医学综述,2010,16(23):3540-3542.
- [10] 莫勇军,杨志,赵劲民,等.NGF促进骨折愈合的适宜浓度初步研究[J].中国修复重建外科杂志,2011,25(5):575-581.
- [11] Garcia R L,Sadighi M,Francis S M,et al.Expression of neurotrophin-3 in the growing velvet antler of the red deer Cervus elaphus[J].Journal of Molecular Endocrinology,1997,19(2):173-182.
- [12] 武立鹏,朱卫国.DNA甲基化的生物学应用及检测方法进展[J].中华检验医学杂志,2004,27(7):73-79.
- [13] Aloe L,Rocco M L,Bianchi P,et al.Nerve growth factor:from the early discoveries to the potential clinical use[J].Journal of Translational Medicine,2012,10:239.
- [14] 翟健程.雌雄驯鹿和梅花鹿茸顶端组织生长调控相关基因DNA甲基化水平差异研究[D].哈尔滨:东北林业大学,2019.
- [15] Schübeler D.Function and information content of DNA methylation[J].Nature,2015,517(7534):321-326.
- [16] 夏彦玲,桂姗姗,喻月婷,等.鹿茸不同生长期MALAT1基因的差异表达[J].东北林业大学学报,2015,43(3):104-106.
- [17] Cowie A,Ivanco T L,Fahnestock M.Mouse NGF promoter upstream sequences do not affect gene expression in mouse fibroblasts[J].Molecular Brain Research,1994,27(1):58-62.
- [18] Yang C,Zhang Y,Song Y Y,et al.Genome-wide DNA methylation analysis of the regenerative and non-regenerative tissues in sika deer (Cervus nippon)[J].Gene,2018,676:249-255.