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梅花鹿骨骼肌纤维类型和能量代谢相关基因表达特性
孙子惠;邢海华;韩若冰;王强辉;李和平;肌纤维数目、大小与类型是肌纤维的基本特性，肌纤维数目与大小决定肌肉产量，肌纤维类型与肌肉品质有密切关系。以不同性别梅花鹿的背最长肌、股四头肌、臀大肌、肋间肌部位肌肉组织为试验材料，对鹿肌肉能量代谢相关基因展开以下研究：对不同部位肌肉组织进行石蜡切片制作，检测肌纤维类型并进行对比；采用实时荧光定量PCR技术探究肌纤维标记基因（MYH1,MYH2,MYH4,MYH7）、线粒体活性相关基因（ATP5F1A,PPARGC1A,PPARD）、电子传递链活性相关基因（UQCRC2,SDHA,NDUFA9）、糖酵解活性相关基因（LDHA,LDHB,GK），在梅花鹿不同性别、不同部位肌肉组织中的表达差异。结果表明：雄性梅花鹿背最长肌、肋间肌、股四头肌的肌纤维横截面积、直径、密度高于雌性梅花鹿，雄性梅花鹿臀大肌的肌纤维横截面积、直径、密度低于雌性梅花鹿；雌性梅花鹿肋间肌、股四头肌和臀大肌中ⅡA型肌纤维标记基因MYH2表达量较高，雄性梅花鹿肋间肌、股四头肌中Ⅰ型肌纤维标记基因MYH7表达量较高，雌性梅花鹿肋间肌、背最长肌和臀大肌中ⅡB型肌纤维标记基因MYH4,MYH1表达量较高，雄性梅花鹿中糖酵解相关基因表达量较高，雌性梅花鹿中电子传递链及线粒体活性相关基因表达量较高。为此，讨论了梅花鹿肌纤维特征与相关基因表达量在梅花鹿肌肉纤维差异中的作用，以期为鹿肉品质的研究提供参考。
梅花鹿、驯鹿与麋鹿血液转录组比较分析
柴云飞;朱宇航;桑佳楠;赵飞;李松泽;司华哲;赵全民;李志鹏;试验旨在探究梅花鹿、驯鹿与麋鹿机体基因表达模式的差异。以3岁龄、健康雄性梅花鹿、驯鹿与麋鹿各5头为研究对象，置于同一鹿场饲养，所有动物每日饲喂相同全混合饲粮，每天饲喂2次，试验预饲期7 d，正试期21 d。在正试期结束后的第1天晨饲后3 h采用盐酸赛拉嗪麻醉梅花鹿、驯鹿和麋鹿，经颈静脉采血并提取血液RNA。采用RNA-seq技术比较3种动物血液基因表达的差异。主成分分析（Principal components analysis,PCA）结果表明：梅花鹿、驯鹿与麋鹿血液的基因表达存在显著差异。与驯鹿相比，梅花鹿血液中共鉴定到2 932个差异表达基因（Differently expressed genes,DEGs），被富集到超长链脂肪酸的代谢过程等GO功能及过氧化物酶体增殖物激活受体（Peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR）信号通路等KEGG通路；与麋鹿相比，梅花鹿血液中共鉴定到6 765个DEGs，被富集到脂蛋白分解代谢等GO功能及核糖体等KEGG通路；与麋鹿相比，驯鹿血液中共鉴定到5 930个DEGs，被富集到蛋白质分泌等GO功能及不饱和脂肪酸的生物合成等KEGG通路。以上结果表明，在相同饲养条件下，梅花鹿、驯鹿与麋鹿机体的基因表达模式存在显著差异，结果可为理解鹿科动物的基因表达模式提供参考。
不同品种梅花鹿成纤维细胞系分离培养与保种库的建立
刘昕;韩志强;张淑莹;赵伟刚;么乃全;李健明;赵全民;杜锐;徐超;为研究梅花鹿成纤维细胞的分离培养方法并建立保种库，通过酶消化培养法和组织块培养法对梅花鹿原代成纤维细胞的分离培养效率进行分析。结果表明：酶消化培养法对梅花鹿成纤维细胞分离培养效果较好，并通过原代培养、冷冻和复苏建立了梅花鹿成纤维细胞保种库。研究结果为梅花鹿种质资源保存、体细胞核移植和基因克隆研究奠定基础。
鹿茸干细胞对大鼠坐骨神经损伤的再生修复作用
叶子豪;李吉萍;王东旭;汪珍;任晶;郭倩倩;李春义;为探讨鹿茸干细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用，选择30只雄性SD大鼠，制备大鼠坐骨神经损伤模型，随机分为3组：鹿茸干细胞（ASC）移植组，大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSC）移植组和生理盐水（对照组），每组各10只。干细胞移植组通过尾静脉注射1×106个细胞（重悬于生理盐水）进行治疗，对照组注射同等剂量的生理盐水。分别于治疗后第7,21天取材检测。行为学观察与足迹分析检测神经功能恢复，组织学染色评估大鼠坐骨神经病理学变化与患侧腓肠肌萎缩恢复情况，免疫荧光染色与RT-qPCR检测坐骨神经再生相关因子（NF200,c-Jun,Periaxin,MPZ与Krox20）的表达。术后3周，与对照组相比，干细胞移植组大鼠坐骨神经功能情况和神经再生情况均出现明显改善，其中ASC移植组效果更显著。坐骨神经功能指数（SFI）结果显示，术后第21天，ASC移植组SFI值显著优于rBMSC移植组与对照组；术后第21天，对照组的患侧腓肠肌的湿重比、肌纤维面积显著低于干细胞移植组；组织学染色结果显示，ASC移植组再生神经纤维数目显著增多，排列规则，NF200表达量显著升高；术后第7天，RT-qPCR结果显示，与对照组相比，ASC移植显著增强c-Jun、Periaxin、MPZ与Krox20基因表达。首次基于鹿茸神经能够周期性再生这一生物学现象，探究鹿茸干细胞对大鼠神经再生修复的作用，明确了ASC移植显著促进大鼠坐骨神经损伤后的再生修复及其运动功能恢复，效果优于rBMSC移植组。
鹿茸干细胞条件培养基通过调控NF-κB通路改善小鼠银屑病样皮损
任晶;王东旭;李吉萍;汪珍;朱爽;马超;李春义;张国坤;为探究鹿茸干细胞（AnSC）的分泌物，即AnSC条件培养基（AnSC-CM）对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的改善作用及其潜在作用机制。采用咪喹莫特乳膏涂抹构建银屑病小鼠模型，将40只小鼠随机分为模型组、骨髓间充质干细胞条件培养基（BMSC-CM）阳性治疗组、AnSC-CM治疗组和正常组，每组10只。形态学观察不同组小鼠皮损严重程度，分析各组小鼠皮损面积和严重程度指数（PASI），苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠损伤皮肤的组织病理变化；免疫组化染色检测AnSC-CM对小鼠表皮细胞异常增殖及炎症的影响；Western blotting检测核转录因子（NF-κB）通路的激活情况。结果表明：与正常组相比，模型组小鼠出现了明显的银屑病病变，红斑评分、鳞屑评分、皮损厚评分、总PASI评分和表皮厚均极显著增加（P<0.01）；与模型组相比，AnSC-CM组和BMSC-CM组皮损症状均减轻，红斑评分、鳞屑评分、皮损厚评分、总PASI评分和表皮厚均极显著降低（P<0.01），且AnSC-CM的效果优于BMSC-CM。进一步研究发现，AnSC-CM还抑制了表皮细胞异常增殖，且AnSC-CM组银屑病样皮损组织中KRT14、PCNA、吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）和CD163的表达量均极显著降低（P<0.01），且NF-κB信号通路相关蛋白（p65,p-p65,IKB,p-IKB）的表达水平均极显著降低（P<0.01）。AnSC-CM可能通过抑制NF-κB信号通路的激活，从而抑制炎症的发生，进而在缓解银屑病中发挥重要作用。
