- 邢海华;郭梦雅;韩若冰;张芙蕊;李和平;
为探讨肌细胞增强因子2(MEF2C)基因在梅花鹿茸生长发育过程中的生物学作用，以梅花鹿茸为试验材料，对其进行T-A克隆，以获得MEF2C基因的cDNA序列，再结合实时荧光定量PCR技术，对梅花鹿茸不同生长阶段(前、中、后期)顶端茸皮组织层MEF2C基因的表达量差异进行分析，结果表明：成功克隆出的梅花鹿MEF2C基因的完整编码区，全长为1 302 bp,共编码433个氨基酸，其中丝氨酸含量最高，占氨基酸总量的13.4%;蛋白质相对分子质量为46 898.44,理论等电点pI值为8.69,脂肪系数为65.77;分子式为C_(2011)H_(3210)N_(600)O_(654)S_(20),总原子数为6 495,不稳定系数为51.83,亲水性平均值为-0.662,MEF2C基因为不稳定的亲水蛋白；二级结构以无规则卷曲为主；亚细胞定位预测为细胞核内；通过Blastp功能对比显示，梅花鹿MEF2C基因与马鹿的同源性最高，为99.54%,与牛、羊的同源性也都超过99%。实时荧光定量结果分析表明，MEF2C基因在鹿茸生长不同阶段的顶端茸皮组织中都有表达，但表达水平不同，中期表达量是前期表达量的3.210 6±0.183 5倍，后期表达量是前期表达量的3.620 1±0.195 1倍，且前期与中期的表达量、前期与后期的表达量存在显著差异(P<0.05),而中期与后期的表达量差异不显著(P>0.05)。
2022年02期 v.26 79-84+90页 [查看摘要][在线阅读][下载 291K] [下载次数：195 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 孙佳阳;张芙蕊;郭梦雅;韩若冰;夏彦玲;李和平;
以梅花鹿茸生长过程的3个重要时期——小鞍子(前期)、二杠(中期)、三杈(后期)的顶端茸皮组织为试验材料，采用BSP法对前、中、后期鹿茸茸皮组织NGF基因启动子区进行DNA甲基化检测与甲基化率的比较分析。结果表明：NGF基因在前、中、后期的茸皮组织均发生不同程度的甲基化，甲基化率分别为(23.99±0.66)%、(22.22±1.78)%和(15.10±1.55)%,但它们之间的甲基化率无显著差异(P>0.05)。NGF基因启动子区的甲基化区域共有30个CG位点，在35,39,42,52,66,95 bp处均发生甲基化，但差异不显著(P>0.05);在115,125,135 bp处前期与后期甲基化率差异显著(P<0.05),前期与中期、中期与后期均差异不显著(P>0.05);223,225,227 bp处的甲基化率前期与中期均显著高于后期(P<0.05),前期与中期差异不显著(P>0.05);在246 bp处甲基化率前期与中期、中期与后期、前期与后期均差异极显著(P<0.01);在347 bp处甲基化率前期显著高于中期与后期(P<0.05),中期与后期甲基化率差异不显著(P>0.05)。
2022年02期 v.26 85-90页 [查看摘要][在线阅读][下载 275K] [下载次数：203 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：0 ] - 赵欢乐;夏彦玲;韩若冰;张芙蕊;李和平;刘伟石;
为获得梅花鹿生肌调节因子(Myf5)基因编码区序列(CDS),并探讨该基因在雌雄梅花鹿及其不同部位的肌组织间差异表达情况，以成年健康雌雄梅花鹿心肌、背最长肌、股四头肌、臀大肌、肋间肌组织为试验材料，以臀大肌组织cDNA为模板克隆获得Myf5基因CDS,运用生物信息学软件进行测序及分析，并利用实时荧光定量PCR技术检测Myf5基因在不同部位的肌组织间相对表达量。结果表明：克隆得到的梅花鹿Myf5基因CDS全长为768 bp;与GenBank上公布的家牛(Gene ID:281335)Myf5基因CDS的同源性为99.61%;梅花鹿与家牛的遗传距离最近，聚为同一支；梅花鹿Myf5蛋白氨基酸组成中丝氨酸含量最高，占氨基酸总量的13.3%;Myf5蛋白具有较强的亲水性，其蛋白二级结构包含α-螺旋、延伸链、无规则卷曲和β-折叠；荧光定量结果分析表明，梅花鹿Myf5基因在雌、雄梅花鹿及其不同部位的肌组织间均有差异性表达。
2022年02期 v.26 91-98页 [查看摘要][在线阅读][下载 377K] [下载次数：220 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 孙江洋;杨福杰;李东;宋禹昊;时坤;宗颖;李健明;杜锐;曾范利;
通过分析不同茸重梅花鹿茸的差异表达基因，筛选可用于区分鹿茸重量的基因。以东丰县梅花鹿为试验对象，同一饲养条件下，采集不同梅花鹿的茸血，进行高通量测序，对差异表达基因进行GO、KEGG富集分析及qRT-PCR验证。结果表明：共有84个差异基因，其中，44个基因上调，40个基因下调。通过GO分析，这些基因共富集到318个条目，其中，分子功能118个、生物过程138个和细胞组分62个；通过KEGG分析，富集于细胞黏附分子(CAMs)、抗原加工递呈、Ⅰ型糖尿病等106条通路。通过P值筛选出8个基因进行qRT-PCR验证，趋势与测序数据相符，TRPC6基因在高产组的相对表达量高于低产组(P<0.01),有望成为筛选种公鹿的候选基因，为后续梅花鹿的良种选育提供理论基础。
2022年02期 v.26 99-106页 [查看摘要][在线阅读][下载 265K] [下载次数：231 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：0 ] - 王春花;赵姬臣;夏彦玲;
为研究狍茸顶端组织的转录组信息，探讨与狍茸生长相关的基因结构及分子机理。使用Illumina Hiseq~(TM) 2000平台进行高通量测序，利用生物信息学方法进行分析。结果表明：通过测序、Trinity软件组装、比对拼接，获得了36 865个Unigenes,平均长932 nt。经过Nr、Swiss-Prot、KEGG、COG、GO等数据库进行比对，共22 983个Unigenes成功比对上Nr数据库，18 273个Unigenes被注释到GO功能分类中，8 668个Unigenes被归类到COG的25个功能类别中。采用FPKM法筛选与狍茸生长发育相关的高表达基因，其中表达量较高的生长因子有8个，转录因子有5个，细胞外基质有8个。利用高通量转录组测序技术(RNA-seq),成功建立了狍茸顶端组织转录组数据库，可为狍茸的发育分子机理研究提供数据支持。
2022年02期 v.26 107-112页 [查看摘要][在线阅读][下载 293K] [下载次数：76 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 李可可;邬慧慧;荆焕松;孙旭阳;顾晓莹;彭静娜;熊家军;
在湖北鄂州一梅花鹿养殖场中发现1头雄性梅花鹿的左眼下部长出一块疑似鹿茸角的组织，将该组织取下，分离消化培养细胞，并对细胞进行茜素红、阿利新蓝、番红固绿、TRAP染色鉴定。将取下的该组织各部位制成切片进行HE染色，在光镜下观察各部位组织的病理组织学变化。结果表明：该组织外形与鹿茸角相似，表面光滑，无分叉，内部组织分层界限明显，分层情况及特征与正常鹿茸顶端组织结构相似，但组织已经骨化，可能与取样较晚有关。
2022年02期 v.26 113-115+120页 [查看摘要][在线阅读][下载 1441K] [下载次数：89 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 王春霞;管春姮;高鹏;于晓蕾;杨彧韬;
通过构建大鼠贫血模型，选择乳酸亚铁作为阳性对照，分别选择梅花鹿血粉低剂量、中低剂量、中剂量、高剂量4个试验组，对比梅花鹿血粉与乳酸亚铁对大鼠的营养性贫血的改善效果，结果表明：梅花鹿血粉与乳酸亚铁的改善效果相同，且在试验过程中没有出现任何不良反应。
2022年02期 v.26 116-120页 [查看摘要][在线阅读][下载 176K] [下载次数：335 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：0 ] - 张爱武;陈新源;王光辉;王响;吴旻;徐海录;宋军;鞠贵春;
为探讨梅花鹿鲜茸水提物对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肠道炎症的保护作用，选取60只雄性成年昆明小鼠随机分为6组，即阳性对照组、阴性对照组、空白对照组、鹿茸水提物高、中、低剂量预保护处理组。阳性对照组灌胃10 mg/kg维生素C,阴性对照组与空白对照组均灌胃10 mL/kg生理盐水，鹿茸水提物高、中、低剂量预保护处理组分别灌胃200,100,50 mg/kg鹿茸水提物，连续灌胃14 d。第15天，空白对照组小鼠腹腔注射3.5 mL/kg生理盐水，其他各组小鼠腹腔注射3.5 mL/kg LPS水溶液，3 h后采集血液、解剖。采用ELISA试剂盒和荧光定量PCR法测定小鼠体内免疫因子和炎性因子的分泌量、炎性因子mRNA相对表达量及氧化应激水平。结果表明：鹿茸水提物预保护处理组的小鼠体质量显著高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);阴性对照组IL-1β和IFN-γ分泌量极显著高于空白对照组(P<0.01);与空白对照组相比，阴性对照组小鼠肝脏中NO的含量极显著升高，CAT和SOD活力极显著降低(P<0.01);与阴性对照组相比，鹿茸水提物预保护处理组NO含量极显著降低(P<0.01),SOD活力极显著升高(P<0.01);与空白对照组相比，阴性对照组LPS可引起小鼠空肠组织中IL-1β、NLRP3、NLRP1a的mRNA相对表达量的异常升高，差异极显著(P<0.01);与阴性对照组相比，鹿茸水提物预处理保护组可抑制3种炎性因子的mRNA相对表达量的异常升高，鹿茸水提物预保护处理组mRNA相对表达量与阳性对照组相近。说明鹿茸水提物可通过降低机体内炎性因子mRNA的相对表达量，减轻炎症级联反应，同时提高机体免疫水平，增强抗氧化能力，从而减轻LPS引起的肠道损伤。
2022年02期 v.26 121-126+137页 [查看摘要][在线阅读][下载 264K] [下载次数：445 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 杨扬;时坤;李健明;杜锐;何忠梅;赵岩;宗颖;
运用网络药理学方法，探索鹿茸有效成分在免疫调节中的作用机制，在BATMAN-TCM数据库中筛选出鹿茸的有效成分并获得相应的目标信息，通过Genecards、0MIM得到免疫相关靶点信息，使用String平台建立蛋白相互作用网络，使用DAVID数据库对鹿茸调节免疫作用靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析，利用R x64 3.4.3软件绘制GO、KEGG富集分析高级气泡图。结果表明：得到活性成分-免疫作用靶点33个，鹿茸涉及生物过程主要有炎症反应、蛋白质合成、癌症通路、NF-κB信号通路等。
2022年02期 v.26 127-137页 [查看摘要][在线阅读][下载 572K] [下载次数：486 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 杨波;邬慧慧;荆焕松;李梦琪;顾晓莹;彭静娜;吕志远;苏柳玥;熊家军;
为解决鹿粪堆肥中纤维素难以降解的问题，提高鹿粪堆肥的发酵速度和发酵质量。通过羧甲基纤维素钠培养基和刚果红染色透明圈以及酶活测定的方法，筛选得到了纤维素降解能力较高的2株细菌A27和A36。A27的羧甲基纤维素酶(CMCase)活力和滤纸酶(FPA)活力分别为0.158 IU/mL和0.073 IU/mL。A36的CMCase活力和FPA活力分别为0.151 IU/mL和0.042 IU/mL。经鉴定A27和A36分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)。菌株拮抗试验表明：A27和A36之间没有明显的拮抗作用，并以1∶1比例混合发酵时的纤维素酶活力最高，CMCase活力和FPA活力分别为0.196 IU/mL和0.100 IU/mL。因此，将A27和A36以1∶1的比例构建复合菌剂应用于鹿粪堆肥中，构建K组(不接种菌剂)、S组(接种复合菌剂)、D组(接种市售菌剂)3个堆肥组，结果表明：接种A27和A36的复合剂能够促进堆肥升温，延长嗜热期，提高堆肥质量。
2022年02期 v.26 138-145页 [查看摘要][在线阅读][下载 449K] [下载次数：500 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ]